堿(jian)性磷酸酶(mei)檢測(ce)試劑(ji)盒的(de)使用(yong)技(ji)巧(qiao)和(he)操作(zuo)規範要(yao)求(qiu)

堿(jian)性磷酸酶(mei)檢測(ce)試劑(ji)盒的(de)使用(yong)技(ji)巧(qiao)和(he)操作(zuo)規範要(yao)求(qiu)

壹、使用(yong)技(ji)巧(qiao)與操作(zuo)規範  

樣(yang)本處理(li)與(yu)儲存(cun)  

血清/血漿需離(li)心(xin)去除沈澱(dian)，組織樣(yang)本需勻(yun)漿後離(li)心(xin)取上(shang)清(qing)，避免反復凍融(rong)（建議分(fen)裝(zhuang)凍(dong)存(cun)於-20℃或-80℃）。  

樣(yang)本采集(ji)後(hou)應盡(jin)快處理(li)，若(ruo)需延遲檢測(ce)，可加入(ru)含抗(kang)生(sheng)素(su)的培養(yang)基(ji)防止(zhi)汙(wu)染(ran)，並(bing)避免含磷酸酶(mei)抑制(zhi)劑(ji)（如(ru)EDTA、氟(fu)化(hua)物(wu)）。  

試劑(ji)準(zhun)備(bei)與(yu)平(ping)衡(heng)  

試劑盒從(cong)冷藏(zang)取出後，需室溫(wen)平衡15-30分(fen)鐘(zhong)，確(que)保(bao)溫度(du)均(jun)勻(yun)。稀(xi)釋(shi)後(hou)的標準(zhun)品(pin)不(bu)可(ke)保(bao)存(cun)，需現(xian)配(pei)現(xian)用(yong)。  

不(bu)同(tong)批號試(shi)劑(ji)不可(ke)混用(yong)，底(di)物B（如(ru)TMB）需(xu)避光(guang)保(bao)存(cun)，避免長時(shi)間(jian)暴(bao)露於光(guang)下(xia)。  

加樣(yang)與操作(zuo)細(xi)節  

使用(yong)校準(zhun)過(guo)的移(yi)液器，加樣(yang)時垂直(zhi)懸(xuan)空於(yu)孔(kong)上(shang)方(fang)，避免觸壁(bi)或產(chan)生(sheng)氣(qi)泡。每(mei)步(bu)加樣(yang)後需震蕩(dang)混勻，確保反應均(jun)勻(yun)。  

設立(li)空白(bai)對(dui)照(zhao)（無(wu)樣(yang)本）、陰性對(dui)照(zhao)（已(yi)知陰性樣本）及(ji)陽性對(dui)照(zhao)（已(yi)知陽(yang)性樣本），以(yi)驗(yan)證(zheng)實(shi)驗(yan)有效(xiao)性。  

溫育(yu)與顯(xian)色控(kong)制  

嚴格按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)設定溫(wen)育(yu)時間(jian)（如(ru)37℃避光(guang)30分(fen)鐘(zhong)）和(he)溫度(du)，避免溫度(du)波動(dong)。顯(xian)色階段(duan)需(xu)嚴格避光(guang)，防止(zhi)底(di)物(wu)過(guo)早(zao)分(fen)解(jie)。  

終(zhong)止(zhi)反應後(hou)需(xu)在(zai)10分(fen)鐘(zhong)內(nei)完(wan)成(cheng)吸(xi)光(guang)度(du)檢測(ce)（如(ru)450nm波(bo)長），確(que)保(bao)結果穩定。  

洗(xi)滌(di)與拍幹技(ji)術(shu)  

每(mei)孔(kong)洗(xi)滌(di)液(ye)需甩(shuai)幹，避免殘留影(ying)響結果。手工洗滌時，可用(yong)吸(xi)水紙輕拍孔(kong)壁(bi)，或使用(yong)自(zi)動洗(xi)板(ban)機提高(gao)效率。  

避免將吸(xi)水紙直(zhi)接插(cha)入孔(kong)內(nei)，防止(zhi)劃傷(shang)酶(mei)標板(ban)表(biao)面，影(ying)響(xiang)後(hou)續檢(jian)測(ce)。  

數(shu)據(ju)分(fen)析(xi)與(yu)結果判(pan)定(ding)  

通(tong)過(guo)標(biao)準品(pin)OD值(zhi)建立(li)標準曲(qu)線(xian)，扣除空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)後(hou)計算樣(yang)本濃度(du)。若(ruo)樣本經過(guo)稀(xi)釋(shi)，需(xu)乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)校正。  

結合(he)臨(lin)床參考(kao)值範圍（如(ru)成(cheng)人血清(qing)ALP正常值(zhi)40-150U/L）進行結果解讀，異常值需(xu)復測(ce)驗(yan)證(zheng)。  

二、堿(jian)性磷酸酶(mei)檢測(ce)試劑(ji)盒關(guan)鍵(jian)註(zhu)意(yi)事項  

汙染防控(kong)：全(quan)程穿戴(dai)防護裝備(bei)（手套、口罩、實(shi)驗(yan)服），使用(yong)壹(yi)次性吸(xi)頭(tou)，避免交叉汙(wu)染。  

設備(bei)校準(zhun)：定(ding)期校準(zhun)移(yi)液器、酶(mei)標儀(yi)，確保(bao)檢(jian)測(ce)精(jing)度(du)。  

異常處理(li)：若(ruo)出現(xian)高(gao)背景(jing)值(zhi)或假(jia)陽(yang)性，檢查(zha)洗滌(di)是(shi)否(fou)幹凈(jing)、試(shi)劑是否過(guo)期，或考(kao)慮(lv)樣本基(ji)質幹擾（如(ru)脂(zhi)血樣(yang)本需離(li)心(xin)去脂(zhi)）。