黃瓜花(hua)葉病(bing)毒(du)是(shi)壹(yi)種(zhong)世界範圍(wei)內(nei)廣泛分布(bu)的植物病(bing)毒(du),能(neng)夠(gou)感染(ran)多(duo)種(zhong)蔬菜和觀(guan)賞(shang)植(zhi)物,導(dao)致葉片(pian)出現(xian)斑(ban)駁、變形(xing)、生(sheng)長遲緩(huan)等(deng)癥(zheng)狀。CMV屬於雀(que)麥(mai)花(hua)葉病(bing)毒(du)科(Bromoviridae),其基因(yin)組(zu)由三(san)個正(zheng)鏈RNA組(zu)成。由於CMV對(dui)農(nong)業生(sheng)產的潛(qian)在威脅(xie),快(kuai)速(su)準確(que)地(di)檢(jian)測該病(bing)毒(du)對(dui)於(yu)病(bing)害(hai)管(guan)理(li)和控制(zhi)至關(guan)重(zhong)要。

黃瓜花(hua)葉病(bing)毒(du)為(wei)正(zheng)二(er)十面體結構的(de)病(bing)毒(du)顆(ke)粒(li),直徑約28-30納(na)米(mi)。病(bing)毒(du)基(ji)因(yin)組(zu)包括三(san)個(ge)單(dan)鏈正(zheng)義(yi)RNA分子(zi):RNA1、RNA2和(he)RNA3。RNA1編碼與病(bing)毒(du)復(fu)制(zhi)相(xiang)關的(de)蛋(dan)白(bai),RNA2編碼兩(liang)個外(wai)殼蛋(dan)白(bai)前(qian)體,而RNA3則(ze)包含運動蛋(dan)白(bai)基(ji)因和兩(liang)個包殼蛋(dan)白(bai)基(ji)因。這些基(ji)因(yin)的(de)表達產(chan)物共(gong)同(tong)決定了(le)病(bing)毒(du)的(de)致病(bing)性和(he)宿(xiu)主範(fan)圍(wei)。
1.血(xue)清(qing)學(xue)檢(jian)測(ce):血(xue)清(qing)學(xue)檢(jian)測(ce)技(ji)術如(ru)酶聯(lian)免疫吸附(fu)試(shi)驗(yan)(ELISA)是(shi)檢(jian)測(ce)CMV的傳統方法(fa)。通(tong)過(guo)制(zhi)備(bei)針對(dui)CMV特定蛋(dan)白(bai)的(de)抗(kang)體,可以(yi)檢測(ce)出植物組(zu)織中(zhong)的(de)病(bing)毒(du)抗(kang)原。這種(zhong)方法(fa)簡便(bian)、快(kuai)速(su),但可能受(shou)到交(jiao)叉(cha)反應的影(ying)響(xiang),導(dao)致特異性不(bu)足(zu)。
2.PCR和實(shi)時(shi)定量(liang)PCR:聚(ju)合(he)酶鏈式反應(ying)(PCR)技術及(ji)其衍生(sheng)技術如(ru)實(shi)時(shi)定量(liang)PCR(qPCR)提(ti)供了(le)更(geng)為(wei)靈敏(min)和特異的(de)檢(jian)測(ce)手段。通(tong)過(guo)設(she)計針對(dui)CMV保(bao)守(shou)區(qu)域(yu)的(de)引物和(he)探針,可以(yi)從植(zhi)物樣(yang)本(ben)中(zhong)擴增出病(bing)毒(du)的(de)核(he)酸,實(shi)現(xian)病(bing)毒(du)的(de)快(kuai)速(su)檢測和定量(liang)分析。
3.分子(zi)雜交(jiao):核(he)酸分子(zi)雜交(jiao)技(ji)術利(li)用(yong)標(biao)記(ji)的(de)核(he)酸探針與目標(biao)病(bing)毒(du)RNA進行特異性結(jie)合(he),通(tong)過(guo)信(xin)號(hao)檢測(ce)來(lai)識(shi)別(bie)病(bing)毒(du)的(de)存在(zai)。這種(zhong)方法(fa)可(ke)以(yi)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)低濃(nong)度的(de)病(bing)毒(du),但操作(zuo)相(xiang)對(dui)復(fu)雜。
4.高(gao)通(tong)量(liang)測(ce)序(xu):隨著(zhe)高(gao)通(tong)量(liang)測(ce)序(xu)技(ji)術的(de)發(fa)展(zhan),宏(hong)基因組(zu)學分析成為(wei)了(le)壹種(zhong)新的(de)病(bing)毒(du)檢(jian)測(ce)手(shou)段。通(tong)過(guo)對(dui)植(zhi)物樣(yang)本(ben)中(zhong)的(de)總核(he)酸進行深(shen)度測(ce)序,可以(yi)獲(huo)得(de)大(da)量(liang)序(xu)列信息(xi),進而通(tong)過(guo)生(sheng)物信(xin)息學分析鑒(jian)定出(chu)CMV等(deng)病(bing)毒(du)的(de)存在(zai)。這種(zhong)方法(fa)不(bu)僅能夠(gou)檢測(ce)已知病(bing)毒(du),還(hai)能(neng)發(fa)現(xian)新(xin)的(de)病(bing)毒(du)種(zhong)類(lei)。
黃瓜花(hua)葉病(bing)毒(du)檢(jian)測(ce)防(fang)治措施:
黃瓜花(hua)葉病(bing)毒(du)的(de)傳(chuan)播(bo)主(zhu)要(yao)通(tong)過(guo)接(jie)觸(chu)、種子(zi)、土壤(rang)和昆蟲等(deng)多(duo)種(zhong)途徑。因此,防(fang)治CMV的(de)策(ce)略(lve)應(ying)包括以(yi)下幾個(ge)方面(mian):
1.使用(yong)無(wu)病(bing)毒(du)種(zhong)子(zi)和(he)苗木(mu):確(que)保(bao)種(zhong)植(zhi)材(cai)料不(bu)攜(xie)帶病(bing)毒(du)是(shi)預(yu)防(fang)CMV傳(chuan)播(bo)的(de)第壹步(bu)。
2.農藝(yi)管(guan)理(li):合(he)理(li)輪作(zuo)、深(shen)翻土壤(rang)、清(qing)除(chu)病(bing)殘(can)體等(deng)農(nong)藝(yi)措施可以(yi)減(jian)少病(bing)毒(du)在(zai)田間(jian)的(de)傳播(bo)。
3.物理(li)隔(ge)離(li):在病(bing)毒(du)流(liu)行區(qu)域(yu),采(cai)用(yong)物理(li)隔(ge)離(li)措施,如使用(yong)防(fang)蟲網,可以(yi)減(jian)少昆蟲介(jie)體的傳(chuan)播(bo)。
4.化(hua)學控制(zhi):雖(sui)然(ran)目(mu)前(qian)沒有(you)直接(jie)針(zhen)對(dui)CMV的(de)治療藥劑(ji),但可以(yi)通過(guo)控制(zhi)傳播(bo)介(jie)體的數量(liang)來(lai)間(jian)接(jie)減(jian)少病(bing)毒(du)的(de)傳(chuan)播(bo)。
5.抗(kang)病(bing)育(yu)種:培(pei)育(yu)和推(tui)廣抗(kang)CMV的品種(zhong)是(shi)長(chang)期(qi)控制(zhi)CMV的有(you)效(xiao)途(tu)徑。