抗性(xing)澱(dian)粉檢測(ce)對人健康的(de)益處(chu)

 

抗性(xing)澱(dian)粉可(ke)以(yi)影響(xiang)人(ren)和動(dong)物(wu)日糧(liang)中各種養(yang)分(fen)的(de)消(xiao)化(hua)與吸收,對人的健康(kang)有利。在延緩糖(tang)尿病(bing)人餐(can)後血(xue)糖(tang)上(shang)升(sheng)、肥胖(pang)控制、預防(fang)腸(chang)道(dao)疾病(bing)、降低(di)血中(zhong)膽固(gu)醇和能量消化(hua)率等(deng)具有重要(yao)的(de)生(sheng)理功能。

 

抗(kang)性(xing)澱(dian)粉檢測(ce)原(yuan)理(li)（AOAC法(fa) 2002.02 ;AACC法(fa)32-40）

樣品(pin)使(shi)用(yong)α-胰澱(dian)粉酶(mei)和澱(dian)粉葡糖(tang)苷(gan)酶(mei)（AMG）37℃振(zhen)蕩(dang)水(shui)浴孵(fu)育(yu)16小時，在這期間，通過兩種(zhong)酶(mei)的(de)聯(lian)合作用(yong)，非抗性(xing)澱(dian)粉被(bei)溶解(jie)，水解(jie)成D-葡萄糖(tang)，孵育結束(shu)後，加入(ru)等(deng)體積(ji)的(de)乙醇或(huo)工(gong)業甲基(ji)化(hua)酒(jiu)精(jing)（IMS,變性(xing)乙醇）終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)。離(li)心(xin)上(shang)述溶液，收集(ji)上(shang)清(qing)勿(wu)棄(qi)，底(di)部(bu)殘留(liu)絮(xu)狀團(tuan)即(ji)為樣品(pin)中的RS，用(yong)含水(shui)的(de)IMS或(huo)乙醇（50%v/v）洗滌絮狀團(tuan)，洗滌後離(li)心(xin)，再重復壹次(ci)洗滌離(li)心(xin)，收(shou)集(ji)離(li)心(xin)後(hou)獲得的上(shang)清(qing)，與(yu)之(zhi)前(qian)收(shou)集(ji)的上(shang)清(qing)混(hun)合。小心(xin)倒(dao)出試(shi)管(guan)殘留(liu)的(de)液體，將(jiang)絮(xu)狀團(tuan)置(zhi)於(yu)冰(bing)水(shui)浴中，加入(ru)2M KOH溶解(jie)，溶解(jie)的同時用(yong)磁力(li)攪(jiao)拌機(ji)劇烈攪(jiao)拌。用(yong)醋(cu)酸鹽緩沖(chong)液將這個(ge)溶液調至中性(xing)，用(yong)AMG將澱(dian)粉定(ding)量水解(jie)成葡萄糖(tang)。D-葡萄糖(tang)用(yong)葡糖(tang)氧化(hua)酶(mei)/過氧化(hua)物酶(mei)試(shi)劑（GOPOD）測(ce)定，這也是對樣品(pin)中RS含量的測定。非抗性(xing)澱(dian)粉（可(ke)溶性(xing)澱(dian)粉）的(de)測(ce)定(ding)可通過集(ji)中的(de)上(shang)清(qing)液並定容至100mL，再用(yong)GOPOD測定(ding)D-葡萄糖(tang)完成。

 

抗性(xing)澱(dian)粉檢測(ce)含量的方法(fa)，其步驟如(ru)下：　　　　

①．取樣：稱取９５－１０５ｍｇ樣品(pin)於離(li)心(xin)試(shi)管(guan)中；　　　　

②．*次(ci)酶(mei)解(jie)反應：加胰(yi)α－澱粉酶(mei)反(fan)應(ying)液３．８－４．５ｍｌ，放入３５－４０℃的水(shui)浴(yu)恒(heng)溫振(zhen)蕩(dang)器(qi)中水(shui)解(jie)，１５－１７小時後取出，加入(ru)３．８－４．２ｍｌ乙醇旋(xuan)渦混勻(yun)，以(yi)２８００－３１００ｒｐｍ的速(su)度離(li)心(xin)１１－１４分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)液，再加入(ru)７－１３ｍｌ乙醇，旋(xuan)渦混勻(yun)，仍然以(yi)２８００－３１００ｒｐｍ的速(su)度離(li)心(xin)１０－１３分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)液；　　　　

③．溶解(jie)抗性(xing)澱(dian)粉：向離(li)心(xin)管(guan)中加入(ru)１．８－２．５ｍｌ氫氧化(hua)鉀溶液，冰(bing)浴(yu)振(zhen)蕩(dang)１６－２１分(fen)鐘(zhong)，再加７．８－９ｍｌ醋(cu)酸鈉(na)緩沖(chong)溶液，搖勻；　　　　

④．第二(er)次酶(mei)解(jie)反應：加入(ru)澱粉葡萄糖(tang)苷(gan)酶(mei)液２００－３５０Ｕ／ｍｌ，放入４８－５５℃水浴(yu)恒(heng)溫振(zhen)蕩(dang)器(qi)中，２６－３１分(fen)鐘(zhong)後(hou)取(qu)出；　

⑤．測定：離(li)心(xin)後(hou)，吸取１００μｌ上(shang)清(qing)液於生(sheng)化(hua)分(fen)析儀(yi)中(zhong)測(ce)定(ding)葡萄糖(tang)，計算(suan)出抗性(xing)澱(dian)粉含(han)量。